Челл (Chell) — подопытная девушка

Как она попала в лабораторию и кем она была до событий Portal — неизвестно. Девушка одета в оранжевую робу (в США подобную носят в тюрьме осуждённые) с надписью «Aperture», а к её ногам прикреплены специальные конструкции, которые спасают её от смерти и ранений при падении с высоты.

ГЛэДОС (GLaDOS, Genetic Lifeform and Disk Operating System — Генетическая Форма Жизни и Дисковая Операционная Система)

Разумный компьютер, разработанный учёными лаборатории в ходе соревнования с «Блэк Меза» за грант, контролирует всю Лабораторию, включая наземную, внешнюю часть. Обретя разум, она (компьютер говорит женским голосом) обрела и сознание. По словам Эллен Маклейн ГЛэДОС испытывает одиночество; этим можно объяснить разговорчивость компьютерной женщины, когда она наконец нашла слушателя — игрока.

У компьютера есть мания к тортикам. ГЛэДОС всю игру разговаривает с Челл о них, как о награде в конце; а на мониторах в зале с компьютером мелькают множественные изображения этих кондитерских изделий.